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两种溶剂组成的梯度洗脱可按任意程度混合,即有多种洗脱曲线:线性梯度、凹形梯度、凸形梯度和阶梯形梯度。线性梯度常用,尤其适合于在反相柱上进行梯度洗脱。在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此带来一些特殊问题,必须充分重视:要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相,有些溶剂在一定比例内混溶,X出范围就不互溶,使用时更要引起注意。当有机溶剂和缓冲液混合时,还可能析出盐的晶体,尤其使用磷酸盐时需特别小心。
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5 安装使用前,请详细阅读此说明书