
产品说明: β-GC(EC 3.2.1.21)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化β-糖苷键水解,具有多方面生理作 用:在纤维素的糖化作用中,β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖;β-GC水解萜烯类香气前 驱体,使糖苷键合态变成游离态。从而产生香味;β-GC能够水解植物体内野黑樱苷,释放HCN,从而防止昆虫取 食。 β-GC分解对-xiao基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-xiao基苯酚,后者在400nm有X大吸收峰,通过测定吸光值升高 速率来计算β-GC活性。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
样本处理
1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(10 4个):提取液体积 (mL)为 500~1000:1 的比例(建议 1000 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),X声波破碎细菌或细胞(冰浴, 功率 20%或 200W,X声 3s,间隔 10s,重复 30 次);15000g 4℃离心 20min,取上清,置冰上待测。
2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.2g 组织,加入 1mL 提取液), 进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心 20min,取上清,置冰上待测。